PCR实验室设计要求(上)

 

        1.PCR实验室平面布局。

        PCR扩增试验实验室原则上分为四个单独的工作区：试剂储存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物制备和扩增区、扩增产品分析区。为避免交叉污染，进入各工作区毕须严格遵循单一方向，即只能从试剂储存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物制备和扩增区→扩增产品分析区。各试验区之间的试剂和样品传输应通过传输窗口进行。

        2.实验室空调通风系统设计及压力控制。

        PCR实验室没有严格的净化要求，但为了避免各实验区之间交叉污染的可能性，应采用全排气的气流组织形式。同时，严格控制送排气比例，确保各实验区的压力要求。

        2.1.试剂储存和准备区。

        试验区的主要操作是储存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合物的制备。样品生产中使用的试剂和材料应直接运输到该区域，不得通过其他区域。试剂原料毕须储存在该区域，并在该区域制备所需的储存试剂。对气流压力的控制没有严格的要求。

        2.2.标本制备区。

        该区域的主要操作是样品的保存、核酸（RNA.DNA）的提取、储存和添加到扩增反应管和DNA测量的合成中。该区域的压力梯度要求为：相对于相邻区域为正压，以避免从相邻区域进入该区域的气溶胶污染。此外，由于加样操作中气溶胶可能造成的污染，应避免不必要的行走。

        2.3.扩增反应混合物配制和扩增区。

        该区域的主要操作是DNA扩展。此外，DNA模板（样品制备区）的添加和主反应混合物（试剂储存和制备区）也可以在该区域进行。该区域的压力梯度要求为：相对于相邻区域的负压，以避免气溶胶从该区域泄漏。为了避免气溶胶造成的污染，应尽量减少该区域不必要的行走。超净台应进行个别操作，如加样。

        2.4.扩大产品分析区。

        该区域的主要操作是测量扩增片段。该区域是扩增产品污染的主要来源，因此该区域的压力梯度要求为负压，以避免扩增产品从该区域扩散到其他区域。

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